Аппаратура, материалы и реактивы:

♦   фотоэлектроколориметр;

♦   колбы конические вместимостью 50 см3;

♦   рН-метр;

♦   пипетки вместимостью 1 и 10 см3;

♦   колба мерная вместимостью 1 дм3;

♦   натрий пиросернистокислый, ч. д. а.;

♦   натрий молибденовокислый, ч. д. а.;

♦   фосфатный буфер с рН 7,2;

♦   натрий фосфорнокислый двухзамещенный 12-ти водный, ч. д. а.;

♦   натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-х водный, ч. д. а.

Приготовление рабочих растворов

Приготовление водного раствора пиросернистокислого натрия с массовой концентра­цией 10 г/дм3.

10 гNa2S2O5растворяют в дистиллированной воде и количественно переводят ди­стиллированной водой в мерную колбу вместимостью 1 дм3, устанавливают темпера­туру 20±1°С. Объем раствора доводят дистиллированной водой до 1 дм3, колбу за­крывают пробкой и содержимое колбы энергично перемешивают взбалтыванием.

Приготовление водного раствора молибденовокислого натрия с массовой концентрацией 20 г/дм3

20 гNa2МоO4 • 2Н2O растворяют в дистиллированной воде и количественно переводят дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 1 дм3, устанавливают темпе­ратуру 20±1°С.

Объем раствора доводят дистиллированной водой до 1 дм3, колбу закрывают проб­кой и содержимое колбы энергично перемешивают взбалтыванием.

Приготовление фосфатного буфера с рН 7,2

Приготовление раствора фосфорнокислого натрия с молярной концентрацией 0,5моль/дм3:

♦  двухзамещенного (Na2НРO4 • 12Н2O)

179 г двухзамещенного фосфорнокислого натрия взвешивают с точностью до 0,0001 г, растворяют в дистиллированной воде и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1 дм3. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают (раствор 1).

♦  однозамещенного (NaН2РO4 • 2Н2O)

78 гсоли, отвешенной с точностью до 0,0001 г, аналогично растворяют в дистилли­рованной воде и доводят до метки в мерной колбе вместимостью 1 дм3 (раствор 2).

Далее путем смешивания 120 см3 раствора 1 и 50 см3 раствора 2 получают буфер­ную смесь с рН 7,2.

Проверку рН смеси осуществляют с использованием рН-метра.

Подготовка образцов пива (сусла) для анализа

♦    Пиво освобождают от диоксида углерода (СО2).

♦    Мутное пиво (сусло) центрифугируют.

Проведение испытания

В коническую колбу вместимостью 50 см3 отмеривают пипетками 10 см3 пива (сусла), 1 см3 фосфатного буфера с рН 7,2, 1 см3 раствора пиросернистокислого натрия с массо­вой концентрацией 10 г/дм3, 1 см3 раствора молибденовокислого натрия с массовой концентрацией 20 г/дм3, смесь энергично перемешивают и оставляют в покое на 10 мин. Через 10 мин измеряют оптическую плотность раствора в кювете вместимостью 10 см3 на волне 400 нм против контроля, которым является смесь: 10 см3 пива (сусла) + 1 см3 фосфатного буфера с рН 7,2 + 1 см3 раствора пиросернистокислого натрия + 1 см3 дистиллированной воды.

Обработка результатов

Содержание в пиве (сусле) антоцианогенов (Ан) в мг/дм3 вычисляют по формуле:

                                                     ОП400 – 0,0320

                             Ан, мг/дм3 = --------------------- • 1000

        4,563

где ОП400 - оптическая плотность раствора, измеренная в кювете вместимостью 10 см3 на волне 400 нм против контроля.

Вычисление производят с точностью до 0,01 мг с последующим округлением до 0,1 мг. Окончательный результат является средним арифметическим двух параллель­ных определений.