Используемые реактивы:

1%-ный раствор ортофенилендиамина: 1 г ортофенилендиамина растворить в мерной колбе на 100 мл в 70-80 мл воды при температуре 40-50°С (выдержать в водяной бане минут 10-15). Охладить раствор и довести до метки дистиллированной водой. Ра­створ хранить в темном месте, в холодильнике.

Стандартный раствор диацетила:

0,5 г диацетила (с точностью до четвертого знака) взвесить в мерной колбе на 100 мл. Концентрация раствора равна 5000 мг/л. Срок хранения реактива 3 месяца в холо­дильнике в темном месте.

Рабочий раствор диацетила:

5 мл стандартного раствора довести дистиллированной водой до метки в мерной колбе на 100 мл. Срок хранения раствора 1 день в темном месте в холодильнике.

Пробоподготовка пива:

отобранную пробу пива объемом не менее 150 мл налить в бутылку с завинчивающей­ся пробкой, поместить в водяную баню при температуре 60°С на 90 минут. Вынув из бани, открыть крышку и сразу закрыть. Остудить до 20°С.

Проведение анализа:

подготовленную пробу пива налить в мерную колбу на 100 мл, перелить в перегонную колбу. Отогнать 25 мл пива в цилиндр, помещенный в емкость с холодной водой. В при­емный цилиндр внести пипеткой 0,5 мл дистиллированной воды, поставив его так, что­бы кончик алонжа был опущен в воду.

После перегонки готовят следующие пробы по две параллельно:

1. Слепая проба. – 10 мл 10%-го раствора этилового спирта.
2. Стандартная проба – 9,9 мл 10%-го раствора этилового спирта.
3. Дистиллят – 10 мл дистиллята.

В пробирки со стандартной пробой налить по 0,1 мл рабочего раствора диацетила. Во все пробирки налить по 0,5 мл 1 %-го раствора ортофенилендиамина, закрыть проб­ками и хорошо перемешать, поставить в темное место на 30 минут.

Перед спектрофотометрированием во все пробирки добавить по 2 мл 4N раствора HCl. Измерения проводить на длине волны 335 нм. Кюветы – 10 мл. Устанавливать ноль перед каждой парой проб по отношению к дистиллированной воде.

Обработка результатов:

Содержание диацетила в пиве определяется по формуле

Д  = ((Сср.д. – Сср.сл.) / (Сср.ст. – Сср.сл)) • Кф,

где

Сср.д. – показание спектрофотометра по дистилляту (среднее по двум параллельным про­бам);

Сср.сл.– показание спектрофотометра по слепой пробе (среднее по двум параллельным пробам);

Сср.ст.– показание спектрофотометра по стандартной пробе (среднее по двум параллель­ным пробам);

Кф - коэффициент пересчета, Кф = 0,617.