Определение аминного азота (медный способ)

Анализ проводится методом, который основан на способности большинства амино­кислот и пептидов образовывать растворимые комплексные соединения с медью (мед­ный способ). Избыток меди оттитровывают, а ее количество, эквивалентное аминному азоту, переводят в соль уксусной кислоты и определяют количественно йодометрическим титрованием.

Приборы: мерная колба вместимостью 50 мл; бумажный фильтр.

Реактивы: раствор хлорной меди (27,3 г хлорной меди растворяют в 1 л дистиллиро­ванной воды); раствор трехзамещенного фосфата натрия (64,5 г двухосновного фосфата натрия растворяют в 500 мл дистиллированной воды с удаленным СО2, добавляют 7,2 гидроксида натрия, после растворения доливают водой до 1 л); боратный буферный раствор (57,21 г буры растворяют в 1,5 л воды, добавляют 100 мл 1 н раствора соляной кислоты и доводят водой до 2 л); суспензия фосфорнокислой меди (1 объем хлорной меди смешивают с 2 объемами раствора боратного буфера; суспензию можно исполь­зовать в течение 2-3 суток); раствор тимолфталеина (0,25 г тимолфталеина растворяют в 100 мл 50%-ного этилового спирта); 0,01н раствор тиосульфата натрия (готовится ежедневно путем разбавления 0,1 н раствора тиосульфата натрия с последующей про­веркой титра по К2JО3; 1%-ный раствор крахмала; 80% (ледяная) уксусная кислота.

Ход анализа. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл прозрачного сус­ла, прибавляют 3-4 капли тимолфталеина и 1н раствор гидрооксида натрия до бледно-голубого окрашивания. Осторожно при перемешивании приливают 30 мл суспензии фосфорнокислой меди и доводят до метки дистиллированной водой. Полученную смесь после перемешивания фильтруют через бумажный фильтр, перефильтровывая первые порции фильтрата

Прозрачный фильтрат (10 мл) подкисляют 0,5 мл 80%-ной уксусной кислоты, при­бавляют к нему 1 г йодистого калия и после размешивания оттитровывают выделив­шийся йод 0,01н раствором тиосульфата натрия. Под конец титрования добавляют 1-2 капли раствора крахмала. Титрование заканчивают при обесцвечивании раствора от одной капли тиосульфата натрия.

Количество пошедшего на титрование тиосульфата натрия, умноженное на 0,28, дает содержание аминного азота в 10 мл фильтрата, что соответствует 2 мл сусла с учетом разбавления.

Количество аминного азота Nа (в мг) в 100 мл сусла вычисляется по формуле:

    0,28n • 100

Nа= -------------------,

                    2

где n– количество 0,01н раствора тиосульфата натрия, пошедшее на титрование выделивше­гося йода, мл.

Пример. На титрование пошло 1,8 мл тиосульфата. Содержание аминного азо­та в 100 мл сусла будет

    0,28 • 1,9 • 100

Nа = ---------------------- = 26,6 мг

                    2